Иммунобиологические свойства рекомбинантных аденовирусных наночастиц как универсальной технологической платформы для создания противогриппозных вакцин

Авторский коллектив:  М. М. Шмаров, С. В. Алексеева, Е. С. Седова, И. Л. Тутыхина, А. И. Тухватулин, Д. Ю. Логунов

КОЛЛЕКТИВНАЯ МОНОГРАФИЯ

Монография посвящена работе по разработке, изучению иммунобиологических свойств и оценке безопасности новых противогриппозных вакцин, основанных на универсальной технологической платформе рекомбинантных аденовирусных наноструктур (РАВН). Раскрыты новые перспективы в борьбе с гриппом – полученные результаты исследований показывают, что РАВН могут служить универсальной технологической платформой для быстрого создания кандидатных противогриппозных вакцин, а предложенная технология – для их масштабного производства и применения в системе здравоохранения РФ.
Для научных сотрудников, аспирантов биологических и медицинских специальностей, врачей и других работников здравоохранения.
УДК 578.22; 571.27

ISBN 978-5-9905764-1-4

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ ……………………………………… 5

ГЛАВА 1. ВОЗМОЖНОСТИ И ПЕРСПЕКТИВЫ СОВРЕМЕННЫХ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕДСТВ…………9
1.1. Вакцинопрофилактика гриппа …………………………9
1.2. Генетическая иммунизация…………………………….10
1.3. Общая характеристика рекомбинантных вирусных наноструктур и перспективы их использования в медицине……………13
1.4. Генетические вакцины на основе РВН……………………..17
1.5. Структурная организация и способы создания рекомбинантных аденовирусных наноструктур…………28
1.6. Способы повышения эффективности генетических вакцин……………….40

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ………….63
2.1. Материалы ………………………………63
2.2. Методы…………………………….67

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ ………………..87
3.1. Конструирование рекомбинантных аденовирусных наноструктур на основе аденовируса человека пятого серотипа (РАВН-Ад5), несущих гены HA вирусов гриппа……….. 87
3.2. Экспрессия генов НА вируса гриппа конструкциями РАВН-Ад5-HA5-2, РАВН-Ад5-HA1-1, РАВН-Ад5-HA3-2, РАВН-Ад5-HAВ in vitro ………………93
3.3. Иммуногенные свойства созданных конструкций РАВН-Ад5 со вставками генов HA вирусов гриппа in vivo и выбор эффективного способа их введения в организм……….96
3.4. Изучение протективных свойств иммунизации РАВН-Ад5-HA5-2 на модели летальной инфекции вируса гриппа у лабораторных животных (мышей) ……105
3.5. Иммуногенность рекомбинантных НА вирусов гриппа экспрессируемых РАВН-Ад5-HA1-1, РАВН-Ад5-НА3-2 и РАВН-Ад5-HAВ……………………..109
3.6. Оценка клеточного иммунного ответа у лабораторных животных, интраназально иммунизированных аденовирусом РАВН-Ад5-HA5-2………..124
3.7. Перекрестный иммунный ответ при интраназальной иммунизации лабораторных животных РАВН, экспрессирующими ген НА вируса гриппа А…………….. 126
3.8. Особенности гетеросубтипического иммунного ответа при введении РАВН-Ад5, экспрессирующих HA вируса гриппа А субтипа H5N2……..133
3.9. Иммуногенные свойства консервативных антигенов вируса гриппа А и попытка создания вакцин широкого спектра действия, защищающих от вирусов гриппа А различных субтипов ……………135
3.10.Определение способности молекулярного адъюванта–кислого пептидогликана – взаимодействовать с Toll-подобными рецепторами врожденного иммунитета in vitro и усиливать иммуногенность РАВН-Ад5…………………141
3.11.Технология получения вакцины на основе РАВН-Ад5 с помощью биореакторов волнового типа: условия культивирования клеток НЕК293, инфекция клеток РАВН-Ад5 и хроматографическая очистка РАВН-Ад5………………..148
3.12.Разработка методов контроля качества препаратов РАВН-Ад5……………168
3.13.Доклинические исследования безопасности кандидатной вакцины против птичьего гриппа на основе РАВН-Ад5-HA5-2……………185
3.14.Доклинические исследования эффективности и безопасности кандидатной трехвалентной противогриппозной вакцины на основе РАВН-Ад5, экспрессирующих HA вируса гриппа А H1N1, H3N2 и вируса гриппа В……………………224

ЗАКЛЮЧЕНИЕ……………………………………………………………..249
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ …………………………………………….266
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК ……………………………273
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ…………………………………………293